qPCR就是quantity PCR，定量PCR，也是荧光定量PCR，检测基因转录水平的表达量。 PCR就是一种技术，通过高温变性、低温复性，适温延伸的循环来扩增基因片段。 PCR根据不同的实验目的可以分 …

引物设计完成之后，还需要对引物的特异性进行验证，例如oligo7、Primer-Blast、PCR产物琼脂糖凝胶电泳等，防止非特异性扩增对数据分析的干扰（做完qPCR后也可通过溶解曲线是否单一来判断）。 …

测qpcr的样品混合好后，可以4度冰箱保存12小时再去上机测吗？ 因为我没及时看暑假仪器使用时间调整，导致无法在周日上机测，但是周一就要回家了，所以想周日晚上混合样品，然后周一早上上机测， …

前向引物：位于外显子3的特异性区域。 反向引物：跨越外显子3和4的剪接点。 引物序列 前向引物：5’-AGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 反向引物：5’-TGCTGCTGCTGCTGCTGCTG-3’ 通过以上步骤和 …

qPCR，也称实时定量PCR，是指在PCR扩增反应体系中加入荧光染料或荧光基团，通过收集荧光信号实时监测扩增产物的量的变化，最后通过标准曲线和Ct值对待测样品进行定量分析。

RT-qPCR原理的三个主要步骤： 1 反转录： 使用逆转录酶和特定引物将RNA样品反转录成cDNA。 该步骤将RNA模板转化为更稳定且可扩增的DNA形式。 反转录过程中使用特定引物。 2 PCR扩增： 使用 …

图1. qPCR绝对定量技术实验流程图 二、qPCR绝对定量标准曲线构建 在上一部分我们介绍了qPCR绝对定量的核心原理是通过构建已知浓度的标准曲线来确定未知样品中靶基因的确切拷贝数。

1.qPCR试剂盒 按照MIQE要求，我们必须在文章中清楚的描述完整的反应条件，包括PCR的反应体系配置，用的什么试剂盒，制造商是谁，多大的反应体系，用的是染料法还是探针法。 事情并非仅仅描 …

在RT-qPCR的实验过程中，大家或多或少都会遇到扩增曲线异常、熔解曲线异常、重复性差等问题。 给大家整理了SYBR Green染料法的常见问题及解决方案，以供大家参考。 Part 1 扩增曲线异常 正常 …

Jun 16, 2021 · 实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)/qRT-PCR，是指在PCR反应体系中加入荧光标记物，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过扩增曲线对未知模板进行定量分析 …